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酶標儀(ELISA儀)是一種用于測定生物樣品中特定分子(如蛋白質、抗體、抗原等)含量的分析儀器。它基于酶標記物與待測物相互作用的原理,并通過測量酶標記物的信號來定量分析目標物的濃度。以下是酶標儀的常用功能原理與應用介紹:
1. 酶標記物:酶標記物是一種能與待測物特異性結合的分子,通常是酶,如辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)。酶標記物可以通過共價結合或非共價結合到待測物上。
2. 酶標記物與待測物的結合:在ELISA實驗中,待測物(如抗原或抗體)被固定在試板上。樣品中的目標物與待測物發生特異性結合。然后,酶標記物(如HRP)結合的目標物形成復合物。
3. 底物反應:待測物與酶標記物結合的復合物形成后,加入適當的底物,如TMB(3.3',5.5'-四甲基聯苯胺)。底物與酶標記物反應產生可測量的顏色變化。
4. 信號檢測與分析:酶標儀通過測量底物反應后的產物的光學密度或熒光強度來定量分析目標物的濃度。光學密度或熒光強度與目標物的濃度呈正相關關系。
酶標儀在醫學、生物學、食品安全等領域中有廣泛應用,常見的應用包括:
1. 臨床診斷:酶標儀可用于檢測血清或尿液中的生物標志物,如病毒、細菌、抗體等,用于早期疾病診斷和監測。
2. 藥物研發:酶標儀可用于評估藥物的有效性和毒性,通過測定藥物對特定蛋白質或抗體的影響來評估藥物的藥理學特性。
3. 植物學研究:酶標儀可用于檢測植物中的激素、養分、抗氧化物質等,用于研究植物生長、代謝和響應環境脅迫的機制。
4. 食品安全檢測:酶標儀可用于檢測食品中的致病微生物、過敏原、殘留農藥等有害物質,用于食品安全監測和質量控制。
總之,酶標儀是一種常用的分析儀器,通過酶標記物與待測物的特異性結合和底物反應來定量分析目標物的濃度。它在醫學、生物學、食品安全等領域中具有廣泛的應用價值。